Vendar, ko se emisijski spektri prekrivajo, se lahko zazna fluorescenca iz več kot enega fluorokroma. Za popravljanje tega spektralnega prekrivanja se uporablja postopek kompenzacije fluorescence. To zagotavlja, da fluorescenca, zaznana v določenem detektorju, izhaja iz fluorokroma, ki se meri.
Zakaj potrebujemo kompenzacijo pri pretočni citometriji?
Za poskus s pretočno citometrijo je potrebna kompenzacija zaradi fizike fluorescence. Fluorokrom je vzbujen in oddaja foton v razponu valovnih dolžin. Nekateri od teh fotonov se razlijejo v drugi detektor, kar povzroči, da so posamezni obarvani vzorci videti dvojno pozitivni.
Kaj je glavni namen uporabe kompenzacijske celice?
Primarni namen je omogočiti merjenje prave fluorescence v primarnem kanalu, kontaminiranem s prelivanjem iz sosednjih fluoroforjev. Zato kompenzacija popravi fluorescenčni »prestop« med fluorofori. Vendar pa ni popoln in ne more odpraviti vseh neželenih učinkov.
Kaj je matrika kompenzacije?
Matrika kompenzacije je izračunana z uporabo enobarvnih fluorescentnih kontrolnih datotek, ki so zbrane na ImageStream ali FlowSight z zbranimi vsemi kanali in brez osvetlitve svetlega polja ali SSC.
Kaj je spektralna kompenzacija?
Uporaba spektrakompenzacija pomeni, da se signal iz neprimarnih detektorjev še vedno uporablja za izboljšanje resničnega signala markerjev, kjer je to mogoče. Primarni kontrolni vzorci se uporabljajo za poimenovanje parametrov. … Vzorci, uporabljeni za primarne detektorje, pomagajo tudi pri poimenovanju teh parametrov po spektralni kompenzaciji.
