V preteklih letih je Coriell uporabil ves toplotno inaktiviran serum za svoje celične kulture za inaktivacijo beljakovin komplementa, ki jih najdemo v serumu novorojenega teleta. Ker smo prešli na fetalni goveji serum, ugotavljamo, da toplotna inaktivacija ni potrebna za večino celičnih linij.
Kako dolgo segrevate inaktivirate FBS?
Za toplotno inaktivacijo fetalnega govejega seruma (FBS) je predlagan naslednji protokol. FBS segrevamo na 56±2°C 30±2 minuti v mešajoči vodni kopeli. Toplotna inaktivacija (HI) – proces, s katerim se FBS vzdržuje pri temperaturi 56±2° 30±2 minuti.
Zakaj je za FBS pred uporabo potrebna toplotna inaktivacija?
Pogosta obdelava FBS je toplotna inaktivacija, kjer FBS segrevamo pri 56°C 30 minut v vodni kopeli z občasnim stresanjem. Namen je inaktivirati vse komponente sistema komplementa, ki so prisotne v FBS [24], in druge potencialne neznane zaviralce rasti celic.
Zakaj morate serum inaktivirati serum?
Cilj toplotne inaktivacije je uničiti aktivnost komplementa v serumu, ne da bi to vplivalo na lastnosti izdelka, ki spodbujajo rast. Odstranitev aktivnosti komplementa iz seruma ni potrebna za večino celičnih kultur, je pa morda potrebna za kulture, ki so občutljive na aktivnost komplementa.
Kako shranjujete toplotno inaktiviran FBS?
Zaščitite odmrznjen FBS in druge serume z varnim hlajenjem inskladiščenje. Odmrznjen serum uporabite takoj. Tekoči FBS in drugi serum lahko hranite v hladilniku (2 do 8 °C) do štiri tedne.