Paraformaldehid naj bi permeabiliziral plazemsko membrano v mnogih primerih do neke mere - ker ima membrana jedrske ovojnice drugačno kemično sestavo (predvsem glede holesterola), ne bi predvideva, da je.
Ali fiksacija skrči celice?
Fiksne beljakovine okoli lukenj bodo držale okvir stabilno. Vsaka vrsta fiksacije pa lahko vodi do zelo rahlega krčenja vaših celic, ki jih morda ne opazite.
Kaj se uporablja za permeabilizacijo celic?
Permeabilizacija se uvede potem, ko so celice pripravljene s fiksirnim sredstvom za sprožitev navzkrižnega povezovanja beljakovin, kot sta formaldehid ali etanol. … Najpogosteje uporabljena sredstva za permeabilizacijo celične membrane sta detergenti Triton-X 100 ali Tween-20, pri čemer je Tween-20 bolj nežen od obeh.
Kaj je paraformaldehid naredil celicam?
PFA povzroča kovalentne navzkrižne povezave med molekulami, ki jih učinkovito zlepi v netopno mrežo, ki spreminja mehanske lastnosti celične površine. Prejšnje študije poročajo, da se celična površina po obdelavi s fiksiranjem strdi [7–10].
Kako permeabilizirate celico?
Permeabilizacija celic s fiksacijo metanola ali acetona ali z uporabo detergenta omogoča protitelesom, da prehajajo skozi celicomembrano in vstopijo v celico. Najpogostejši reagent, ki se uporablja za permeabilizacijo celic, je neionski detergent, Triton X-100.
