Produkt omejevalne prebave je mogoče enostavno shraniti pri -20 C. Pri 4 C bi bilo v redu, vendar bi zagotovili, da ni aktivnosti in ni zvezdne aktivnosti. priporočljivo hraniti pri -20 C.
Kako shranjujete prebavljeno DNK?
Poskusite rezino gela shranite v hladilnik čez noč ali celo stopite rezino v pufru in jo zamrznite pri -20°C ali -80°C. Razgradnja DNK bo potekala z enako hitrostjo in pod enakimi pogoji kot topna DNK, zato za daljše shranjevanje uporabite nižjo temperaturo.
Kaj pomeni, da se plazmid prebavi?
Prečiščena plazmidna DNK se prebavi z 1 ali več restrikcijskimi encimi (RE), izbranimi tako, da dobijo razločen vzorec DNK trakov, ki ga zlahka razrešimo z elektroforezo. … Običajno so izbrani omejevalni encimi, ki se razrežejo na mestu večkratnega kloniranja (MCS) in povzročijo diagnostični vzorec 2-5 pasov, ki jih je enostavno razrešiti.
Kako shranjujete linearizirane plazmide?
Če vas skrbijo učinki TE v smeri toka, shranite DNK pri višji koncentraciji in jo po potrebi razredčite ali uporabite "nizko TE", ki je 10 mM Tris / 0,1 mM EDTA. ko sta DNK ali RNA čista, jo lahko hranite pri -20C več mesecev brez kakršne koli razgradnje.
Kako dolgo lahko hranite povzetek omejitev?
Pro-Tip Odvisno od aplikacije in količine DNK v reakciji se lahko inkubacijski čas giblje od 45 minut do čez noč. Za diagnostične povzetke je pogosto dovolj 1-2 uri. Za digeste s >1 µg DNK, uporabljene za kloniranje, je priporočljivo, da prebavite vsaj 4 ure.
