Inkubirajte posodo pri sobni zmerni temperaturi 2-3 minute . Trdno oprijete celice je mogoče hitro odstraniti pri 37 °C. Opazujte celice pod mikroskopom. Odstranjene celice so pod mikroskopom videti zaobljene in lomljive.
Kaj se zgodi, če predolgo poskusite celice?
Inkubacija celic s previsoko koncentracijo tripsina za predolgo časovno obdobje bo poškodovala celične membrane in ubila celice. Če niste prepričani o koncentraciji tripsina za uporabo, uporabite nizko koncentracijo.
Kako poskusite celice?
Celice lahko resuspendirate z nežnim pipetiranjem celične suspenzije, da razbijete kepe. Po potrebi se lahko izvede nadaljnje redčenje za število celic in/ali subkulturo.
Kako dolgo traja, da se celice pritrdijo?
prve celice se pritrdijo že po 3-5 min! Po mojih izkušnjah je bila večina EC pritrjenih po 10-20 minutah. Toda dlje ko čakate, bolj trdna je nastavek.
Ali je slabo poskusiti celice dva dni zapored?
Da, škodljivo je, če tripsinizirate svoje celice neprekinjeno po 24 urah cepljenja. Priporočljivo je, da cepljenje opravite po 48 urah cepljenja. … Celice lahko vzdržujete, dokler morfologija ni dobra (odvisno od vrste celice, nekatere celice lahko obsegajo do 80 prehodov, nekatere pa do 10).
