Protitelesa za kontrolo nalaganja so pomembne kontrole, saj kažejo na enako obremenitev vzorcev v vseh vdolbinah. Kontrole nalaganja kažejo tudi pravilen prenos beljakovin na membrano med postopkom Western blotting. Kontrole nalaganja so običajno beljakovine z visoko in vseprisotno ekspresijo.
Kaj naredi nadzor nalaganja?
Kontrola nalaganja je beljakovina, ki se uporablja kot kontrola v Western blotting poskusu. … uporabljajo se za zagotovitev, da so beljakovine enakomerno naložene v vse vdolbinice.
Zakaj uporabljamo kontrolo nalaganja v Western blotu?
Kontrole nalaganja imajo drugo vlogo kot kontrola v western blotih. Uporabite jih lahko, da preverite, ali je prišlo do enakomernega prenosa iz gela na membrano po celotnem gelu. To je nujno, ko se primerjajo ravni izražanja beljakovin med vzorci.
Kako uporabljate nadzor nalaganja v Western blotu?
Signali iz kontrol nalaganja se običajno uporabljajo za normalizacijo signalov iz beljakovin, ki nas zanimajo. Za uporabo kontrole obremenitve za te namene je treba odkrivanje s kontrolnim proteinskim protitelesom in eksperimentalnim protitelesom opraviti na istem blotu. Številne različne beljakovine se uporabljajo kot kontrole nalaganja.
Zakaj se aktin uporablja kot nadzor nalaganja?
Beta-aktin, se običajno uporablja kot nadzor nalaganja za Western Blot zanormalizirati zaznane ravni beljakovin s potrditvijo, da je obremenitev z beljakovinami v gelu enaka.
